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《临床免疫学检验》理论教学大纲
2016-06-30 12:59 lcwm  审核人:

《临床免疫学和免疫学检验》课程教学大纲

课程名称:临床免疫学和免疫学检验英文名称:Clinical Laboratory Immunology

课程类别:专业必修课             授课对象:医学检验专业

学时 数:  108                  授课科室:临床微生物免疫教研室

编写日期: 20130720


一、课程教学目的与任务

《临床免疫学和免疫学检验》是医学检验专业的重要专业课程之一。在学习医学免疫学的基础之上,它主要讲述临床免疫学的基本理论、基本技术以及常见免疫相关性疾病的免疫学特征及免疫学诊断。本课程具有重要的实践性和应用性,除了培养学生的理论修养外,更应注意学生独立思考、解决实际问题能力的培养以及实验方法和技术的训练。通过该课程的学习,让学生能熟练应用常用的免疫学检验技术,掌握免疫相关疾病相关免疫学诊断,并能对诊断结果进行合理的解释和分析。由于免疫学是当今生命科学中最前沿的学科之一,因而还要求学生了解免疫学的新知识、新理论和新技术,使学生既能适应一般临床免疫学检验工作,又有一定创新工作的能力。教师在教学活动中可根据课程要求适当补充新知识新理论,可引导学生课外学习,了解相关领域发展前沿,拓展学生视野。

二、课程学时分配

     

三、课程内容及教学要求

第一单元   绪论

【目的要求】 掌握本门课程的目的及其任务,知晓临床免疫学检验是研究免疫学检测理论、技术、应用,免疫性疾病的发病机理、免疫学诊断及防治的一门医学领域的应用学科;了解临床免疫学检验的发展概述,回顾免疫学概念、免疫系统与免疫应答等基础知识。

【教学组织与方法】

理论课讲授2学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1         临床免疫学检验的发展概述;

2         回顾免疫学概念、免疫系统与免疫应答等基础知识;

3         临床免疫学检验的目的及任务。

【英文专业术语】

Clinicallaboratory immunology, clinical immunology

【思考题】

1如何认识临床免疫学检验的目的及任务?

第二单元  抗原抗体反应

【目的要求】 掌握抗原抗体反应的原理、特点、主要影响因素;了解抗原抗体反应的基本类型。

【教学组织与方法】

理论课讲授2学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1         抗原抗体反应原理(抗原抗体结合力、抗原抗体的亲和力和亲合力、亲水胶体转化为疏水胶体);

2         抗原抗体反应特点(反应的特异性、比例性、可逆性);

3         抗原抗体反应的影响因素(抗原、抗体及反应环境);

4         抗原抗体反应的基本类型。

【英文专业术语】

Antigen-antibodyreaction, serological reaction, specificity, reversibility, proportionality,equivalence zone, zone phenomenon

【思考题】

1  抗原抗体反应中,抗原与抗体分子之间存在哪些作用力?

2  体外抗原抗体反应具有哪些主要特点?

3  影响抗原抗体反应的环境因素主要有哪些?

第三单元  免疫原与抗体的制备

【目的要求】 掌握免疫佐剂的概念,常用免疫原的制备,单克隆抗体的特点,杂交瘤技术制备单克隆抗体的原理和流程,免疫血清的制备流程,抗血清的保存方法;了解佐剂种类和作用,动物的选择和接种方法,抗血清的鉴定,单克隆抗体的应用,基因工程抗体。

【教学组织与方法】

理论课讲授4学时,实验教学7学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1         免疫原的制备:颗粒性免疫原、可溶性免疫原等的制备;佐剂的概念、作用与常用种类,良好的免疫原是制备优质抗体的关键;

2         免疫血清的制备:多克隆抗体的概念,动物的选择、免疫途径与采血法,抗血清纯化、鉴定(特异性、效价、纯度、亲和力等)与保存;

3         单克隆抗体制备技术:单克隆抗体的概念和特性、杂交瘤技术的基本原理,单克隆抗体的应用;

4         基因工程抗体:基因工程抗体的概念及优点。

【实验内容】  人血清IgG纯化、抗SRBC血清制备

【英文专业术语】

Monoclonalantibody(McAb), Polyclonal antibody(PAb), genetically engineered antibody(GEAb),immunogen, adjuvant, antiserum, epitope, hypoxanthine, aminopterin, thymidine

【思考题】

1  免疫佐剂的概念及作用是什么?

2  单克隆抗体的概念和特点是什么?

3  保存抗血清有哪些方法?

4  试述杂交瘤技术的基本原理。

第四单元  凝集反应

【目的要求】 掌握凝集反应的原理、常用类型;了解凝集反应的临床应用及自身红细胞凝集试验等。

【教学组织与方法】

理论课讲授2学时,实验教学6学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1         凝集反应的定义;

2         常用的凝集反应类型(直接凝集反应、间接凝集反应、抗球蛋白试验、自身红细胞凝集试验等)的原理、方法及临床应用。

【实验内容】  ABO血型鉴定、试管凝集试验、胶乳凝集试验等

【英文专业术语】

Agglutinationreaction, direct agglutination reaction, indirect agglutination reaction,passive agglutination, agglutinogen, agglutinin, tube agglutination test, co-agglutination reaction, indirect hemagglutination test, latex agglutinationtest, antiglobulin test

【思考题】

1  凝集反应的常用类型有哪些?

2  试述常用的凝集反应类型的原理及用途。

第五单元 沉淀反应

【目的要求】 掌握单向扩散试验和双向扩散试验的方法及应用,免疫电泳的基本原理和常见免疫电泳反应类型;了解液体内沉淀试验、免疫浊度测定的原理和影响因素等。

【教学组织与方法】

理论课讲授4学时,实验教学6学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1  液相沉淀试验:絮状沉淀试验、环状沉淀试验;

2  凝胶内沉淀反应的基本原理、技术要点、临床应用:自由免疫扩散(单向免疫扩散、双向免疫扩散)、定向免疫扩散(对流免疫电泳、火箭免疫电泳等)、定向-自由联合免疫扩散(免疫电泳等);

3  免疫浊度分析技术:透射免疫比浊、散射免疫比浊等,免疫浊度分析的影响因素。

【实验内容】  单向琼脂扩散试验、双向琼脂扩散试验、对流免疫电泳等

【英文专业术语】

Precipitation,fluid-phase precipitation, ring precipitation, immunoturbidimetry, gel-basedprecipitation,, single immunodiffusion, double immunodiffusion, counterimmunoelectrophoresis, rocket immunoelectrophoresis, immunoelectrophoresis

【思考题】

1  比较沉淀反应与凝集反应的不同之处。

2 试述各种常用沉淀反应类型的基本原理和用途。

3  免疫浊度测定影响因素主要包括哪些?

第六单元  补体参与的反应及补体测定

【目的要求】 掌握总补体溶血活性测定原理及意义,旁路途径溶血活性、补体成分活性及含量测定的方法及意义;了解补体结合试验的原理与应用。

【教学组织与方法】

理论课讲授2学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1  复习补体系统及活化途径;

3  补体溶血活性测定及含量测定:CH50APH50C4BF等。

2  补体结合试验的原理、技术要点及应用;

【实验内容】  SRBC血清溶血效价测定、CH50

【英文专业术语】

Complement,complement fixation test, complement hemolysis 50% assay(CH50 assay),alternative pathway hemolysis 50% assay(APH50 assay)

【思考题】

1  简述CH50测定原理及意义。

2  试述补体结合试验原理及应用。

第七单元  免疫标记技术

【目的要求】 掌握酶联免疫吸附试验的原理、技术类型及要点,酶免疫组织化学技术原理,荧光免疫显微技术基本原理及类型,胶体金免疫技术的原理及主要类型;了解常用的酶及相应底物,膜载体的酶免疫测定中不同方法的实验原理及应用,生物素-亲和素系统相关的酶联免疫技术,荧光免疫技术中的相关概念和常用的荧光物质,放射免疫分析、免疫放射分析的基本原理、常用放射性核素等。

【教学组织与方法】

理论课讲授6学时,实验教学6学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1         酶免疫技术:

1  酶免疫技术原理、特点和类型等

2  酶联免疫吸附试验原理、基本技术类型、要点及用途;

3  酶免疫印迹试验原理及技术要点;

4 生物素-亲和素系统相关的酶联免疫技术;

5  酶免疫组织化学技术的概念、技术要点及应用。

2         荧光免疫技术:

1)概述:荧光的基本知识、常用荧光物质等;

2)荧光免疫显微技术:基本原理、技术类型和要点、方法评价、临床应用。

3  放射免疫技术:

1)概述:常用放射性核素等;

2)放射免疫分析和免疫放射分析;

4  胶体金免疫测定技术:斑点金免疫渗滤试验,斑点金免疫层析试验,临床应用及评价。

【实验内容】  ELISA斑点金免疫层析试验(尿HCG测定)

【英文专业术语】

Fluorescenceimmunoassay, radioimmunoassay (RIA), immunoradiometric assay(IRMA), enzymeimmunoassay(EIA), enzyme immunohistochemistry(EIH), enzyme linked immunosorbentassay(ELISA), enzyme immunoblotting testEIBT),biotin-avidin-system(BAS), colloidal gold immunoassay, immunogold

【思考题】

1       试述酶联免疫吸附试验的几种基本技术类型的原理、技术要点及用途。

2       试述荧光免疫显微技术的几种基本技术类型的原理、技术要点及用途。

3       举例说明胶体金免疫技术的原理及主要类型。

第八单元  免疫自动化检测技术

【目的要求】 掌握流式细胞仪的免疫分析原理、重要检测参数及其在免疫学中的应用,化学发光免疫分析技术的基本原理,时间分辨荧光免疫测定的基本原理;了解化学发光免疫分析技术的主要方法类型和用途,时间分辨荧光免疫测定的主要方法类型和临床应用。

【教学组织与方法】

理论课讲授6学时,实习4学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1         流式细胞术:

1)流式细胞仪的基本原理;

2)流式细胞仪免疫分析的技术数据的显示与分析要点;

3)流式细胞术在免疫学中的应用。

2         化学发光免疫分析技术:

1)概述:发光与化学发光效率等概念;

2)发光剂与标记技术;

3)化学发光免疫分析技术的类型;

4)化学发光免疫技术在检验医学中的应用。

3         时间分辨免疫荧光测定基本原理、技术类型和临床应用。

【实验内容】  流式细胞仪、化学发光免疫分析仪、时间分辨免疫分析仪参观

【英文专业术语】

Flowcytometry,  forward scatter(FSC), sidescatter(SSC), chemiluminescence immunoassay(CLIA), time-resolved fluorescenceimmunoassay(TRFIA)

【思考题】

1       什么是流式细胞术?试述其基本原理及用途。

2       简述化学发光免疫分析技术的原理和主要类型。

3       简述时间分辨免疫荧光测定基本原理。

第九单元  免疫细胞的分离与检测技术

【目的要求】 掌握TB淋巴细胞的常用分离技术,TB淋巴细胞的数量、表面标志及功能检测,吞噬细胞的功能测定;了解NK细胞等的表面标志和功能检测。

【教学组织与方法】

理论课讲授4学时,实验教学8学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1         免疫细胞的分离与纯化:白细胞的分离、外周血单个核细胞的分离(密度梯度离心法)、淋巴细胞和单核细胞的分离纯化、淋巴细胞亚群的分离,细胞活力测定;

2         TB淋巴细胞的数量检测:免疫标记技术、花环技术等;

3         TB淋巴细胞的功能检测:T细胞增殖试验、T细胞介导的细胞毒试验、溶血空斑试验等;

4         NK细胞的功能检测:形态学法、酶释放法等;

5         吞噬细胞的功能检测:中性粒细胞趋化、吞噬和杀菌功能检测,巨噬细胞吞噬功能检测等。

【实验内容】  单个核细胞分离、E花结试验、淋巴细胞转化试验,大小吞噬细胞吞噬功能检测等

【英文专业术语】

Immunocyte,peripheral blood mononuclear cell(PBMC), lymphocyte transformation test(LTT),hemolytic plaque assay, neutrophil granulocyte(NPG), phagocytic rate,phagocytic index

【思考题】

1       如何从外周血中分离TB淋巴细胞?

2       成熟TB细胞的主要表面标志有哪些?

3       T细胞功能检测试验有哪些?

4       如何测定吞噬细胞的功能?

第十单元  免疫分子的检测

【目的要求】 掌握细胞因子的定义及含量检测的常用方法,白细胞分化抗原的常用测定方法,HLA血清分型;了解细胞因子功能检测方法、细胞因子受体检测,粘附分子的常用的测定方法,HLA细胞学分型方法。

【教学组织与方法】

理论课讲授4学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1         细胞因子测定方法(生物学测定法、免疫测定法、分子生物学测定法)

2         细胞因子受体测定方法(膜结合受体、可溶性受体);

3         白细胞分化抗原测定;

4         粘附分子的测定;

5         HLA分型:血清学方法、细胞学方法。

【英文专业术语】

Cytokine,interlukin(IL), colony stimulating factor(CSF), interferon(IFN), tumor necrosisfactor(TNF), chemotactic cytokine, growth factor(GF), cytokine receptor, cellsurface marker, leukocyte differentiation antigen, cluster ofdifferentiation(CD), adhesion molecule(AM), human leukocyte antigens(HLA),microcytotoxicity assay, mixed lymphocyte culture(MLC)

【思考题】

1       细胞因子、白细胞分化抗原、粘附分子的定义。

2       细胞因子含量的常用检测方法有哪些?

3       HLA-III类抗原分别可选用何种分型方法?

第十一单元  超敏反应性疾病及免疫学检测

【目的要求】 掌握超敏反应的概念、分型、发生机制,重要免疫学检测(血清总IgE和特异性IgE检测、循环免疫复合物的检测、I型和IV型皮肤试验等);了解各型超敏反应的临床常见疾病。

【教学组织与方法】

理论课讲授4学时,实验教学2学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1  超敏反应的定义及分型;

2  Ⅰ型超敏反应的发生机制,临床常见疾病(过敏性休克、支气管哮喘、呼吸道过敏反应、皮肤过敏反应、消化道过敏反应等),免疫学检验(皮肤试验、血清总IgE和特异性IgE检测等);

3  Ⅱ型超敏反应的发生机制,临床常见疾病(输血反应、新生儿溶血症、药物过敏性血细胞减少症、自身免疫性溶血性贫血、重症肌无力等),免疫学检验(参见抗球蛋白试验、荧光免疫技术等相关章节);

4  Ⅲ型超敏反应的发生机制,临床常见疾病(血清病、链球菌感染后肾小球肾炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等),免疫学检验(循环免疫复合物的检测);

5  Ⅳ型超敏反应的发生机制,临床常见疾病(感染性迟发型超敏反应性疾病、接触性皮炎、某些自身免疫病等),免疫学检验(皮肤试验、淋巴细胞增殖试验等)。

【英文专业术语】

Hypersensitivity,immediate hypersensitivity, allergy, anaphylaxis, allergen, allergins,circulating immune complex(CIC), delayed type hypersensitivity(DTH)

【思考题】

1       什么叫超敏反应?可分成哪些类型?

2       试述各型超敏反应的发生机制。

3       简述血清总IgE与特异性IgE的检测方法。

第十二单元  自身免疫病及免疫学检验

【目的要求】 掌握自身免疫病的概念及基本特征,自身抗体(ANARF等)的检测及意义;了解自身免疫病的免疫损伤机制、常见的自身免疫病(如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等),了解其他相关的免疫学检测。

【教学组织与方法】

理论课讲授4学时,实验教学6学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1         自身免疫病概述(定义、基本特征、分类);

2         自身免疫病的发病相关因素:自身抗原、免疫调节机制紊乱、生理及遗传因素等;

3         自身免疫病的免疫损伤机制:自身抗体、免疫复合物、自身反应性T细胞;

4         常见自身免疫病:系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等;

5         自身免疫病的免疫学检测:自身抗体(包括ANARFANCA等)及其他相关免疫学检测。

【实验内容】 ANA、 抗ENA抗体、RF等的测定。

【英文专业术语】

Autoimmunedisease(AID), autoimmune tolerance, autoantibody, autoreactive T lymphocyte,autoimmunity, systemic lupus erythematosus(SLE), rheumatic arthritis(RA),antinuclear antibody(ANA), double stranded DNA(dsDNA), extractable nuclearantigen(ENA), rheumatoid factor(RF), antineutrophil cytoplasmic antibody(ANCA)

【思考题】

1       什么叫自身免疫病?

2       试述自身免疫病的基本特征。

3       举例说明自身抗体检测的方法和意义。

第十三单元 免疫增生性疾病及免疫学检验

【目的要求】 掌握免疫增生性疾病、单克隆蛋白、本周蛋白的概念,单克隆蛋白的检测方法;了解免疫增生病的分类、免疫损伤机制,常见的免疫球蛋白增殖病。

【教学组织与方法】

理论课讲授2学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1         免疫增生性疾病的概念与分类;

2         免疫增生性疾病的免疫损伤机制(浆细胞异常增殖、正常体液免疫抑制、异常免疫球蛋白增生、溶骨性病变等);

3         常见免疫球蛋白增殖病(如多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症、重链病、轻链病等);

4         单克隆免疫球蛋白病的免疫检测(血清免疫球蛋白定量、血清蛋白区带电泳、免疫电泳、免疫固定电泳等)。

【英文专业术语】

Immunoproliferativedisease(IPD), immunoglobinopathy, monoclonal immunoglobinopathy, monoclonalprotein(MP), Bence-Jonce protein, multiple myeloma(MM), primarymacroglobinemia, heavy chain disease(HCD), light chain disease(LCD), benignmonoclonal immunoglobinopathy(BMG)

【思考题】

1       什么叫免疫增生性疾病?

2       单克隆免疫球蛋白病的免疫检测包括哪些方面?

第十四单元 免疫缺陷病及免疫学检验

【目的要求】 掌握免疫缺陷病的概念和基本特征、原发性免疫缺陷病的代表性疾病(如性联无丙种球蛋白血症、选择性IgA缺乏症、先天性胸腺发育不全、重症联合免疫缺陷病、原发性中性粒细胞缺陷病、慢性肉芽肿病等),AIDS的主要免疫学特征,各类免疫缺陷病的主要免疫学检测方法的选择;了解免疫缺陷病的分类。

【教学组织与方法】

理论课讲授2学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1         免疫缺陷病的分类及基本特征;

2         原发性免疫缺陷病:原发性B细胞缺陷病,原发性T细胞缺陷病,原发性联合免疫缺陷病,原发性吞噬细胞缺陷病,原发性补体系统缺陷病;

3         继发性免疫缺陷病的常见原因,获得性免疫缺陷综合征(AIDS);

4         免疫缺陷病检验:B细胞缺陷病的检测,T细胞缺陷病的检测,吞噬细胞缺陷病的检测,补体系统缺陷病的检测,基因诊断,获得性免疫缺陷综合征的检测。

【英文专业术语】

Immunodeficiencydisease(IDD), primary B lymphocyte deficiency, primary T lymphocyte deficiency,combined immunodeficiency disease(CID), severe combined Immunodeficiencydisease(SCID), granulocytopenia, acquired immunodeficiency syndrome(AIDS),human immunodeficiency virus(HIV)

【思考题】

1       什么叫免疫缺陷病?

2       试述原发性B细胞缺陷病、原发性T细胞缺陷病、原发性联合免疫缺陷病,原发性吞噬细胞缺陷病的基本免疫特征。

3       AIDS的主要免疫学特征是什么?

第十五单元  感染性疾病及免疫学检验

【目的要求】 掌握机体抗细菌和病毒等病原体感染的主要免疫机制,了解常见感染性疾病的免疫学检验项目及其检测的临床意义。

【教学组织与方法】

理论课讲授2学时,实验教学3学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1         不同病原体感染的免疫机制:细菌感染与抗细菌免疫机制,病毒感染与抗病毒免疫机制,寄生虫感染与抗寄生虫免疫机制;

2         免疫学检验的应用:微生物抗原检测、微生物特异性抗体检测、细胞免疫功能检测、常见感染性疾病的免疫学检测(如肥达试验、抗“O”试验、甲、乙、丙型肝炎病毒血清学指标、HIV感染抗原抗体检测、TORCH等)。

【实验内容】  同第四单元(肥达试验、ASO等)

【英文专业术语】

Obligateintracellular microbe, anti-streptolysin(ASO), TORCH

【思考题】

1  简述机体抗细菌和病毒感染的主要免疫机制。

第十六单元  肿瘤免疫及免疫学检验

【目的要求】 掌握肿瘤抗原的定义、分类临床应用,肿瘤的免疫学检验;了解肿瘤的发病因素、机体的抗肿瘤免疫效应机制、肿瘤的免疫逃逸机制。

【教学组织与方法】

理论课讲授2学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1         概述:肿瘤免疫学

2         肿瘤抗原:肿瘤特异性抗原、肿瘤相关抗原(胚胎抗原如AFPCEA等,分化抗原如PSA等);

3         机体抗肿瘤的免疫效应机制;

4         肿瘤的免疫逃逸机制;

5         肿瘤的免疫学检验:常用的肿瘤标志物,肿瘤患者免疫功能状态评价。

【英文专业术语】

Tumorimmunology, tumor antigen, tumor specific antigen(TSA), tumor associatedantigen(TAA), fetal antigen, differentiation antigen, tumor marker(TM),alpha-fetoprotein(AFP), carcinoembryonic antigen(CEA), prostate specificantigen(PSA)

【思考题】

1       什么叫肿瘤抗原、肿瘤特异性抗原、肿瘤相关抗原、胚胎抗原、分化抗原、肿瘤标志物?

2       简述AFPCEAPSA检测的临床意义。

第十七单元  移植免疫及免疫学检验

【目的要求】 掌握移植抗原、移植排斥反应的定义,同种异型抗原的提呈与识别机制,移植排斥反应的分类,GVHR发生的必要条件,移植排斥反应的免疫学防治措施及移植术后免疫学检测,了解移植免疫学发展简史,移植免疫的前沿研究。

【教学组织与方法】

理论课讲授2学时,运用多媒体教学。

【教学内容】

1         移植免疫学发展简史;

2         引起排斥反应的靶抗原:主要组织相容性抗原、次要组织相容性抗原等;

3         移植排斥反应的种类和发生机制:直接识别与间接识别,HVGR(超急性排斥、急性排斥、慢性排斥)、GVHR

4         排斥反应的免疫防治措施:供者选择、配型、移植物或受者预处理、免疫抑制;

5         移植排斥反应的免疫学监测;

6         移植免疫的前沿研究:移植免疫耐受等。

【实验内容】  CDC试验

【英文专业术语】

Graft,recipient, host, donor, transplantation, transplantation rejection,transplantation antigen, major histocompatibility antigen(MHA) , minorhistocompatibility antigen(mHA) , host versus graft reaction(HVGR), graftversus host reaction(GVHR)

【思考题】

1       什么叫GVHR?什么叫HVGR

2       GVHR发生必须具备哪些条件?

四、考试形式与方法

1.期末考试60%)

2.平时成绩(包括实验报告、课堂讨论、实验技能测试等)(40%)

五、本课程与其它课程的联系和分工

本课程是医学检验专业的专业必修课,先修课程包括《医学免疫学》、《医学微生物学》的基础医学各门课程,同时需要《分子生物学》、《临床生物化学和生物化学检验》、《临床血液学检验》、《临床检验基础》等医学检验专业课程知识。

六、教材及主要参考书

1.教材

《临床免疫学检验》第2版,吕世静主编,北京:中国医药科技出版社.20101

《临床免疫学与检验》第4版,王兰兰主编,北京:人民卫生出版社.201012

2.主要参考书

《临床免疫学》谭景泉,邓涛主编,北京:科学出版社.200411

《医学免疫学》(案例版)吕世静,毕胜利主编,北京:科学出版社.20071

《医学免疫学》(第5版)金伯泉主编,北京:人民卫生出版社.20086

3.杂志

《中华微生物和免疫学杂志》    

《中国免疫学杂志》            

J. Immunology

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